《生物技术综合实验》是2009年出版的图书,本书共分为四部分。

出版时间

2009年3月

ISBN

9787122047892

页数

161 页

定价

22 元

出版社

化学工业出版社

内容简介

《生物技术综合实验》共分为四部分。第一部分为基因工程技术,重点介绍外源基因在大肠杆菌中的克隆与表达,由9个实验组成。第二部分是生物大分子的分离纯化及活性检测,包括大肠杆菌中表达的外源蛋白的分离纯化与检测(7个实验)、动物血中超氧化物歧化酶提取、纯化与活性鉴定(5个实验)两章。第三部分是细胞工程及检测技术,分为鸡胚成纤维细胞培养技术(9个实验)、卵清蛋白多克隆抗体的制备与检测(6个实验)、原生质体的分离、融合与杂交细胞的筛选(7个实验)三章。第四部分是发酵工程与酶工程,分为谷氨酸发酵生产技术(9个实验)、实验室啤酒发酵技术(13个实验)、淀粉酶的发酵生产(9个实验)三章。各学校可根据条件和培养方向选用。[1]

目录

第一篇基因工程技术

第一章外源基因在大肠杆菌中的克隆与表达2

实验一大肠杆菌的对照培养、单菌落的分离及菌种保存2

实验二大肠杆菌基因组DNA的提取3

实验三PCR扩增制备目的基因5

实验四质粒DNA提取8

实验五质粒DNA和目的基因的酶切和连接10

实验六琼脂糖凝胶电泳检测、回收目的基因13

实验七感受态细胞的制备和重组子转化14

实验八转化克隆的筛选和鉴定16

实验九外源基因的诱导表达18

第二篇生物大分子的分离纯化及活性检测

第二章大肠杆菌中表达的外源蛋白的

分离纯化与检测21

实验一小量表达及细胞破碎21

实验二表达蛋白的SDSPAGE电泳分析23

实验三包涵体的洗涤、溶解、复性25

实验四从包涵体中纯化表达蛋白28

实验五固化Ni2+吸收光谱纯化histag表达蛋白30

实验六Western blotting免疫印迹检测表达蛋白32

实验七碱性磷酸酶(AP)米氏常数(Km)的测定34

第三章动物血中超氧化物歧化酶的提取、纯化与活性鉴定38

实验一原材料的预处理38

实验二超氧化物歧化酶的活性测定39

实验三粗酶液的制备41

实验四金属螯合色谱分离纯化超氧化物歧化酶42

实验五离子交换色谱纯化超氧化物歧化酶43第三篇细胞工程及检测技术

第四章鸡胚成纤维细胞培养技术48

实验一实验器材的清洗48

实验二实验器材的包装和消毒50

实验三培养用液的配制和无菌处理51

实验四鸡胚成纤维细胞的原代细胞培养54

实验五细胞克隆和纯化57

实验六细胞的传代培养59

实验七细胞生长曲线的测定60

实验八细胞的冻存和复苏61

实验九动物细胞融合63

第五章卵清蛋白多克隆抗体的制备与检测65

实验一实验动物的抓取、固定和注射方法65

实验二实验动物的处死与取血方法68

实验三实验动物的免疫方法70

实验四抗血清的制备72

实验五双向琼脂扩散实验检测抗体效价73

实验六间接ELISA法检测抗体75

第六章植物原生质体的分离、融合与杂交细胞的筛选78

实验一培养基母液的配制78

实验二培养基的配制与灭菌80

实验三愈伤组织的诱导与培养83

实验四原生质体的制备84

实验五原生质体的活力测定87

实验六原生质体的融合88

实验七杂交细胞的筛选90

第四篇发酵工程与酶工程

第七章谷氨酸发酵生产技术94

实验一谷氨酸菌种的制备94

实验二噬菌体的检测95

实验三大肠杆菌谷氨酸脱羧酶酶粉的制备96

实验四发酵过程中还原糖的测定97

实验五发酵过程中谷氨酸含量的测定99

实验六谷氨酸发酵液的除菌体101

实验七谷氨酸的离子交换回收102

实验八谷氨酸的等电回收及精制103

实验九谷氨酸钠质量控制及分析106

第八章实验室啤酒发酵技术108

实验一啤酒酵母的纯种分离108

实验二啤酒酵母的计数110

实验三啤酒酵母的质量检查111

实验四啤酒酵母的扩大培养115

实验五麦芽汁的制备116

实验六麦芽汁糖度的测定120

实验七啤酒主发酵123

实验八总还原糖含量的测定125

实验九α氨基氮含量的测定127

实验十酸度和pH的测定129

实验十一酒精度的测定及原麦芽汁浓度的计算131

实验十二色度和苦味物质含量的测定135

实验十三二氧化碳含量的测定137

第九章淀粉酶的发酵生产139

实验一淀粉酶产生菌的分离、筛选与鉴定139

实验二发酵条件优化及酶学性质研究143

实验三淀粉酶产生菌的改良146

实验四淀粉酶的发酵生产148

实验五淀粉酶活力的测定150

实验六盐析处理和透析152

实验七离子交换剂的色谱处理154

实验八浓缩和冷冻干燥155

实验九淀粉酶的包埋处理及热稳定性

测定157

参考文献160[1]